細胞成骨誘導(dǎo)
成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液配備與誘導(dǎo)操作：
1、準備含10%FBS的α-MEM培養(yǎng)液；
2、在備好的α-MEM培養(yǎng)液中添加50μM 抗壞血酸, 10mmβ-磷酸甘油和100nm地塞米松；
3、準備6孔培養(yǎng)板，將P4細胞按照5×103個/平方厘米的規(guī)格接種于原始α-MEM培養(yǎng)液中；
4、待細胞長至基本融合后，更換上述制備完成的成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液；
5、每三天換液一次，細胞長至7天時進行堿性磷酸酶染色；
6、二十八天后再進行礦化結(jié)節(jié)的茜素紅染色。
素紅染色方法介紹：
1、去除細胞當(dāng)前使用培養(yǎng)液，使用PBS清洗兩次；
2、使用10%甲醛室溫固定15分鐘，完成后使用重蒸餾水沖洗兩次；
3、按照1ml/孔加入40mM的茜素紅染色液，室溫孵育20min并輕微振蕩；
4、清除掉沒有*結(jié)合的染料，用重蒸餾水漂洗并振蕩5min重復(fù)4次；
5、傾斜放置2min,吸取多余的重蒸餾水；倒置顯微鏡觀察拍照記錄。
實驗注意事項：
客戶提供：
細胞種類和誘導(dǎo)分化細胞類型。
收費標準/服務(wù)周期/提供結(jié)果：
詳談，我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務(wù)協(xié)議。
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