外泌體提取
服務(wù)簡介:
外泌體是一類幾乎所有類型的細(xì)胞都能分泌的大小介于30-150nm的含有RNA和蛋白質(zhì)等物質(zhì)的微小囊泡結(jié)構(gòu),廣泛存在于各種體液中參與調(diào)控重要的細(xì)胞生理活動(dòng)。Exosome攜帶蛋白質(zhì)包括源細(xì)胞非特異性和源細(xì)胞特異性兩類蛋白分子。前者可能與exosome的生物發(fā)生和生物學(xué)作用有關(guān),另一類是特殊蛋白質(zhì),這類蛋白質(zhì)只存在于某種特殊的細(xì)胞分泌的exosome,而這些特定細(xì)胞源的exosome與其生物學(xué)功能有著密切。包含的RNA大部分為miRNA,其余為rRNA、lncRNA、DNA和其他RNA。
服務(wù)流程:
1、樣品收集處理
2、外泌體提取、質(zhì)檢
3、RNA抽提、質(zhì)檢
4、高通量測序
5、標(biāo)準(zhǔn)信息分析
6、高級信息分析
7、表達(dá)差異分析和定制化信息分析
服務(wù)要求:
1、準(zhǔn)備新鮮或凍存的血液上清液置于冰上。如果樣品是凍存的,放置于25-37 ℃水浴鍋直至血液*溶解后,置于冰上。
2、小心將血液上清液,過0.45um濾膜,收集過濾液。
服務(wù)流程:
1、吸取0.5ml的血液到一干凈的管子,56℃水浴15分鐘
2、4 ℃ 12000rpm離心5分鐘,取上清至新的離心管
3、向該離心管中分別加入0.05ml的提取液1和0.05ml的提取液2。
4、上下顛倒管子或用移液槍吹打,直至血液上清液和提取液*混勻。
5、在冰上孵育2小時(shí)。
6、4 ℃ 12000rpm離心10分鐘。
7、小心,快速吸去上清,加800ul的提取液 3,用移液槍反復(fù)吹打管底沉淀。
8、4 ℃ 12000rpm離心10分鐘。
9、小心,快速吸去上清,用30ul 重懸液吹打,溶解管底外泌體沉淀。
10、用于下游的蛋白、核酸、和其他分析。未及時(shí)使用時(shí),分裝后-80 ℃保存。
注意事項(xiàng):
A、本試劑盒不適用于從其他體液或細(xì)胞上清中分離外泌體。其他相關(guān)體液的外泌體提 取試劑盒是根據(jù)不同 生物樣品進(jìn)行了相應(yīng)的提取優(yōu)化,請分別訂購。
B、通常情況下,0.25-0.5ml血液就能提供足夠的外泌體樣品用于常用的下游分析。
C、對于從大體積的血液樣品中(>5ml)分離外泌體,建議按照1ml/份進(jìn)行相應(yīng)的分裝,提取以確保充分的外泌體提取效率。
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
詳談,我們會(huì)根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。
【本公司合作項(xiàng)目】
慢病毒,腺病毒,RNAi類,分子生物實(shí)驗(yàn),病理實(shí)驗(yàn),免疫學(xué)實(shí)驗(yàn),細(xì)胞實(shí)驗(yàn),動(dòng)物實(shí)驗(yàn),蛋白組學(xué)實(shí)驗(yàn)等,能夠進(jìn)行藥效學(xué)評價(jià)、毒理學(xué)評價(jià)、細(xì)胞藥篩、動(dòng)物建模、病理檢測、蛋白組學(xué)、代謝組學(xué)、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學(xué)分析服務(wù)!
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外泌體提取/外泌體
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