mRNA干擾慢病毒構建
實驗原理:
慢病毒屬于逆轉錄病毒科,名稱源自該種病毒長達數年的潛伏期,其中zui為人所知的是人類免疫缺陷病毒(HIV-1)。HIV-1直徑約120nm,含兩條正鏈RNA,可有效的進入細胞核中,對分裂期細胞及非分裂期細胞均具有很高的感染效率。對以HIV-1為基礎進行的慢病毒載體的改造,主要是去除致病基因減少輔助質粒與載體質粒的同源性,zui終體現在滴度、生物安全性和外源基因表達效率上的提高,見結構示意圖。
慢病毒包裝系統(tǒng)特點:可通過順式作用元件將攜帶的基因運送到細胞核,將要表達的基因序列整合到細胞基因組中,后續(xù)可以通過篩選穩(wěn)轉株獲得持續(xù)穩(wěn)定的高表達。
服務流程:
1、客戶提供背景資料,我們共同探討服務的可行性和技術路線。
2. 簽訂技術服務合同,商定服務收費、任務期限等,客戶需要預付實驗總費用的50%-70%作為實驗預付款。
3. 實驗結束,按合同內容交付結果。
實驗流程:
1. shRNA表達載體的選用:客戶可以根據實驗的需要選用不同的慢病毒載體。
2. 設計RNAi靶序列:
3. shRNA慢病毒載體構建:合成模板、雙酶切shRNA空載體、連接與轉化、測序鑒定、質粒制備及定量。
4. 提供實驗結果: 我們將提供包裝純化好的各靶點的慢病毒顆粒、測序結果、滴度檢測結果和病毒構建包裝純化實驗報告等。
收費標準/服務周期/提供結果:
詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協(xié)議。
【本公司合作項目】
慢病毒,腺病毒,RNAi類,分子生物實驗,病理實驗,免疫學實驗,細胞實驗,動物實驗,蛋白組學實驗等,能夠進行藥效學評價、毒理學評價、細胞藥篩、動物建模、病理檢測、蛋白組學、代謝組學、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學分析服務!
詳情請咨詢:
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