細(xì)胞凋亡中, 染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)的作用下,將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過(guò)氧化物 酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標(biāo)記到DNA的3'-末端,從而可進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測(cè),這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法 (terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA的斷裂,因而沒有3'-OH形成,很少能夠被染色。TUNEL實(shí)際上是分子生物學(xué)與形態(tài)學(xué)相結(jié)合 的研究方法,對(duì)完整的單個(gè)凋亡細(xì)胞核或凋亡小體進(jìn)行原位染色,能準(zhǔn)確地反應(yīng)細(xì)胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征,可用于石蠟包埋組織切片、冰凍組織切片、培 養(yǎng)的細(xì)胞和從組織中分離的細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)測(cè)定,并可檢測(cè)出極少量的凋亡細(xì)胞。
一、細(xì)胞凋亡檢測(cè)(tunel)技術(shù)服務(wù)服務(wù)流程
1. 根據(jù)客戶送的樣本(固定好或者包埋好),以及樣本類型,安排實(shí)驗(yàn)
2.包埋或者切片后,根據(jù)客戶所測(cè)指標(biāo),選取合適的一抗.二抗進(jìn)行制片
3.(可選)根據(jù)上述所做好的切片進(jìn)行拍片
4.(可選)針對(duì)做好的玻片進(jìn)行分析,分析時(shí)選取較好的區(qū)域,分析三個(gè)視野
5.提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告:包括詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方法及實(shí)驗(yàn)結(jié)果的相關(guān)圖表
二、細(xì)胞凋亡檢測(cè)(tunel)技術(shù)服務(wù)實(shí)驗(yàn)周期及價(jià)格
服務(wù)項(xiàng)目 | 試驗(yàn)周期 | 價(jià)格 |
包埋 | 2~3個(gè)工作日 | 20元/樣本 |
制片 | 10~15個(gè)工作日 | 200元/標(biāo)本/片 |
拍片 | 2~3工作日 | 10元/樣本/片 |
常規(guī)分析 | 2~3工作日 | 30元/片 |
結(jié)果分析及實(shí)驗(yàn)報(bào)告 | 2~3個(gè)工作日 |
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三、交貨內(nèi)容
完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過(guò)程、所用儀器試劑、蠟塊玻片和相關(guān)分析數(shù)據(jù)
四、服務(wù)說(shuō)明
a. 請(qǐng)?zhí)峁┍M量多的實(shí)驗(yàn)材料
b.客戶須在實(shí)驗(yàn)開始前確保其細(xì)胞或組織中有目的蛋白的表達(dá),并提供目的蛋白的相關(guān)信息(蛋白名稱、大小等信息)
c.客戶應(yīng)對(duì)所提供的材料及信息負(fù)責(zé),如因客戶提供的材料及信息不準(zhǔn)確而引起的實(shí)驗(yàn)延誤或經(jīng)濟(jì)損失由客戶承擔(dān)
服務(wù)承諾:
一.會(huì)在zui短的時(shí)間內(nèi)快速將實(shí)驗(yàn)完成
二.保證檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、客觀、可信,但不能確保一定要得到某特定結(jié)果