免疫組化,是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理--抗原抗體反應(yīng),即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學(xué)反應(yīng)使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry)。
免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體,單克隆抗體是一個B淋巴細胞克隆分泌的抗體,應(yīng)用細胞融合雜交瘤技術(shù)免疫動物制備。多克隆抗體是將純化后的抗原直接免疫動物后,從動物血中所獲得的免疫血清,是多個B淋巴細胞克隆所產(chǎn)生的抗體混合物。
常用的染色方法
根據(jù)標記物的不同分為免疫熒光法,免疫酶標法,親和組織化學(xué)法,后者是以一種物質(zhì)對某種組織成分具有高度親合力為基礎(chǔ)的檢測方法。這種方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗體)在細胞或亞細胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法zui常用。
從實驗結(jié)果而言,免疫組化技術(shù)服務(wù)主要涉及抗體實驗結(jié)果的描述與分析,圖片的確定與選取,相關(guān)數(shù)據(jù)的提供,上述工作是免疫組化工作的重點內(nèi)容,只有嚴格的實驗設(shè)計,標準的實驗操作,專業(yè)化的結(jié)果分析才能更好的滿足客戶的要求,這點對于形式為腹水,上清,培養(yǎng)液之類的抗體顯得更為重要。關(guān)于上述服務(wù)內(nèi)容應(yīng)該在實驗開始前由雙方明確,一般而言,客戶方實驗前應(yīng)提出需要什么樣的結(jié)果與分析,例如是簡要還是詳細的描述實驗結(jié)果,需要實驗數(shù)據(jù)否,圖片的數(shù)量與規(guī)格等。如果為雙盲試驗或有第三方參與,則事先申明。