細(xì)胞凋亡檢測是細(xì)胞的一種基本生物學(xué)現(xiàn)象,在多細(xì)胞生物去除不需要的或異常的細(xì)胞中起著必要的作用。它在生物體的進(jìn)化、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定以及多個系統(tǒng)的發(fā)育中起著重要的作用。不僅是一種特殊的細(xì)胞死亡類型,而且具有重要的生物學(xué)意義及復(fù)雜的分子生物學(xué)機(jī)制。
細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一,它在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面起著十分重要的作用。形態(tài)學(xué)檢測是研究細(xì)胞凋亡的基本方法。細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化是多階段的,起初,細(xì)胞間連接和微絨毛消失,細(xì)胞體積縮小,胞漿凝縮,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)變疏松并與胞膜融合,形成一個個空泡,核糖體與線粒體等細(xì)胞器聚集,結(jié)構(gòu)尚無明顯改變,細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)逐漸凝聚成新月狀附在核膜周邊,細(xì)胞核固縮呈均一的致密物,進(jìn)而斷裂成碎塊,此時細(xì)胞膜仍保持完整:然后,胞膜及核膜不斷出芽、脫落,一個細(xì)胞變成數(shù)個大小不等的有膜包裹的凋亡小體:最后凋亡小體被周圍具有吞噬能力的細(xì)胞吞噬、消化。上述這些形態(tài)學(xué)的變化,可以通過本試劑盒中的染色及光學(xué)顯微鏡觀察。
細(xì)胞凋亡是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定,由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死不同,不是一件被動的過程,而是主動過程,涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等的作用,并不是病理條件下,自體損傷的一種現(xiàn)象,而是為更好地適應(yīng)生存環(huán)境而主動爭取的一種死亡過程。
細(xì)胞凋亡檢測有如下優(yōu)點(diǎn):
(1)高靈敏度:背景染色極低,陽性染色明亮,可以在單細(xì)胞水平檢測到細(xì)胞凋亡,同時由于凋亡早期就有DNA斷裂,可以檢測到早期的細(xì)胞凋亡。
(2)特異性:檢測時通常更容易標(biāo)記凋亡細(xì)胞,而不容易標(biāo)記壞死細(xì)胞。
(3)快速:僅需約1-2個小時即可完成。
(4)方便:只需一步染色反應(yīng),洗滌后即可觀察,不必使用二抗等進(jìn)行多步操作。
(5)應(yīng)用范圍廣:可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況,也可以檢測培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。