免疫組化原理很簡(jiǎn)單,蘇木素染色法也是常用的一種染色方法。木素染色后的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色,細(xì)胞漿呈現(xiàn)粉紅色或紅色。染色液也可以重復(fù)使用,直至認(rèn)為效果不佳時(shí)再換用新的染色液。
免疫組化內(nèi)質(zhì)呈淡藍(lán)黑色,外質(zhì)收縮,剩下部分不著色或色澤更淺。圓形細(xì)胞核呈藍(lán)黑色。居中的核仁呈黑色小圓點(diǎn)。核膜較薄,其內(nèi)側(cè)緣均勻,整齊地排列著一層細(xì)小的染色質(zhì)粒。核仁與核膜之間可見到核網(wǎng)。被吞噬的紅細(xì)胞呈藍(lán)黑色采用蘇木素染色液進(jìn)行免疫染色后的復(fù)染,操作步驟簡(jiǎn)便,操作時(shí)間短??梢圆僮鞑襟E簡(jiǎn)便,操作時(shí)間短或培養(yǎng)細(xì)胞的染色,或與免疫組織化學(xué)、免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫熒光、原位雜交等配合使用。使用蘇木素染色液染色后還可以進(jìn)行免疫染色或其它染料的復(fù)染。
目前免疫組化技術(shù)應(yīng)用于臨床主要有以下幾個(gè)方面:
1、腫瘤良惡性的判斷:對(duì)于反應(yīng)性增生還是腫瘤性增生,可用免疫球蛋白(Ig)的輕鏈抗體檢測(cè)B淋巴細(xì)胞增生的單克隆或多克隆性來區(qū)別。
2、確定腫瘤分期:腫瘤分期是判斷預(yù)后的一個(gè)指標(biāo),與是否浸潤(rùn)、有無(wú)淋巴管或血管侵襲密切相關(guān),判斷腫瘤是否浸潤(rùn)、有無(wú)淋巴管或血管侵襲。
3、細(xì)胞屬性的判定:通過特定抗體標(biāo)記出細(xì)胞內(nèi)相應(yīng)的抗原成分,來判定細(xì)胞的屬性,確定腫瘤的來源。
4、確定來源不明的轉(zhuǎn)移瘤的原發(fā)部位:對(duì)于來源不明的轉(zhuǎn)移瘤,用該技術(shù)有助于確定惡性腫瘤的組織學(xué)來源,進(jìn)一步確定原發(fā)部位。
5、對(duì)“未分化”惡性腫瘤的分類:未分化惡性腫瘤包括癌或肉瘤,在HE切片上由于腫瘤的“未分化”而缺少腫瘤細(xì)胞的起源特征不能分類,初步區(qū)分組織學(xué)類型用非特異性抗體,在其基礎(chǔ)上再選用特異性抗體做進(jìn)一步鑒定。
6、進(jìn)一步分類不同器官與組織交界處腫瘤:由于重疊的特征,在一些組織器官交界處的腫瘤,僅憑組織學(xué)基礎(chǔ)對(duì)腫瘤進(jìn)行分類很困難。如發(fā)生于組織交界處的腫瘤有睪丸胚胎癌與精原細(xì)胞癌,兩者較難區(qū)別,且治療與預(yù)后顯著不同,但用免疫組化檢測(cè)角蛋白就較易于區(qū)別:角蛋白陰性則為精原細(xì)胞癌,而角蛋白陽(yáng)性則為胚胎癌。
7、及時(shí)準(zhǔn)確的發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶:在常規(guī)組織切片中,辨別單個(gè)或幾個(gè)轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞很難,淋巴結(jié)內(nèi)竇性組織細(xì)胞增生與某些癌的早期轉(zhuǎn)移有時(shí)也不易區(qū)別,而采用免疫組化方法,有助于及時(shí)準(zhǔn)確的發(fā)現(xiàn)微小(癌)轉(zhuǎn)移灶。