肝癌耐藥細胞的建立就是體外低濃度培養(yǎng)細胞,逐漸誘導耐藥?？墒钦麄€過程耗時長,易受污染,成功率一般。后來了解到還可以通過裸鼠荷瘤的方式，給裸鼠腹腔注射藥物逐漸誘導耐藥，zui后取瘤組織研碎制成細胞懸液在再培養(yǎng)幾代可得腫瘤細胞。這樣時間就縮短了很多~而且不受污染等條件限制。肝癌耐藥細胞的建立實驗是通過細胞與低劑量的藥物長期接觸，引起細胞本身生物化學過程的改變，細胞膜上出現(xiàn)Pgp(或P-170)糖蛋白，使細胞逐漸對藥物耐受。
 

　　實驗方法原理腫瘤細胞的原代培養(yǎng)與正常細胞的原代培養(yǎng)的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，10%血清濃度即可，在原代培養(yǎng)時需加入原代細胞培養(yǎng)的特制添加物，或原患者血清(1%-2%)以利細胞生長。用細胞生長因子如胰島素、雌激素等等。也可以考慮動物媒介培養(yǎng)。根據(jù)細胞種類不同選用不同的促細胞生長因子。
 

　　腫瘤細胞對化療藥物產(chǎn)生耐藥是目前導致臨床化療失敗的主要原因，成為目前阻礙腫瘤治療的絆腳石。因此，探索腫瘤細胞產(chǎn)生耐藥的原因以及如何改善腫瘤細胞對化療藥物耐藥仍是目前研究的熱點和難點。腫瘤細胞耐藥的產(chǎn)生是一個復雜的過程，它的機制廣泛牽涉到藥物代謝學、病理學、生理學等多個學科，這就決定了腫瘤細胞對化療藥物產(chǎn)生耐藥的機制是復雜的，因此體外建立肝癌耐藥細胞仍然是研究腫瘤細胞耐藥機制的重要方法。
 

　　肝癌耐藥細胞注意事項：
 

　　1、觀察細胞在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行，否則不能準確判斷細胞的傳代密度?？醇毎男螒B(tài)請在10X或20X物鏡下。
 

　　2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
 

　　3、有些細胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。
 

　　4、收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請及時與我們。