ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中
現(xiàn)代的科學技術是日新月異的,試驗試劑產(chǎn)品也都在不斷的優(yōu)化和改善。ELISA試劑盒使用抗原抗體之間專一性結合的特性,對樣本進行檢測的試驗辦法,經(jīng)過底物顯色深淺代表待測物在樣本中含量的多少。
ELISA試劑盒操作步驟:
1、加標準品:在酶標包被板上設標準品孔,依次加入不同濃度的標準品50ul(建議每個濃度做2個平行孔)。
2、加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl,然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6、加酶:除空白孔外每孔加入酶標試劑50μl。
ELISA試劑盒在根底中具有的特性:
1、水溶性、低黏度、無腐蝕、不易燃、不污染環(huán)境。
2、所采用的辦法特異性好,活絡度、準確度、精密度。
3、所用規(guī)范品或規(guī)范參閱物契合推薦規(guī)范和要求。
4、貯存期至少為1年。
用途:
1、其抗原抗體反響具有高度的特異性。
2、將酶催化反響的擴大效果和抗原抗體親和反響的高度專一性、特異性相結合,以酶標記的抗原或抗體作為首要試劑進行免疫測試,所以具有很高的活絡度。
3、完成了在細胞或亞細胞水平上示蹤抗原或抗體的地點部位,或在微克、乃至納克水平上對其進行定量。